Što su antitijela u krvi - sorte i indikacije za analizu, norma i uzroci odstupanja

Laboratorijski testovi potrebni su za postavljanje ispravne dijagnoze, pomažu liječnicima da utvrde težinu bolesti, stupanj oštećenja unutarnjih organa i odaberu najbolji režim liječenja. Krvni test na antitijela obvezan je za trudnice i one pacijente koji imaju oslabljen imuni, reproduktivni ili genitourinarni sustav, štitnjaču.

Vrste antitijela

Tijekom različitih životnih razdoblja, ljudsko se tijelo "upoznaje" s raznim patogenima, kemikalijama (kemikalijama za kućanstvo, lijekovima), proizvodima raspada vlastitih stanica (na primjer, s ranama, upalama, gnojnim lezijama kože). Kao odgovor na to, on počinje proizvoditi vlastite imunoglobuline ili antitijela u krvi - to su posebni proteinski spojevi formirani iz limfocita i koji djeluju kao imuno-stimulansi.

U imunološkim laboratorijima izolirano je pet vrsta antitijela od kojih svako djeluje strogo na određene antigene:

  • IgM je prvi imunoglobulin koji se počinje stvarati kada infekcija uđe u tijelo. Njegova uloga je potaknuti imunitet na primarnu borbu protiv bolesti.
  • IgG - pojavljuje se 3-5 dana nakon početka bolesti. Formira stabilan imunitet na infekcije, odgovoran je za učinkovitost cijepljenja. Ova klasa proteinskih spojeva je tako male veličine da može prodrijeti kroz placentarnu barijeru, formirajući primarni imunitet fetusa..
  • IgA - štiti gastrointestinalni trakt, mokraćni sustav i dišne ​​puteve od virusa, bakterija, mikroba. Vezuju strane predmete, ne dopuštajući im da se učvrste na zidovima sluznica.
  • IgE - aktiviraju se kako bi zaštitili tijelo od parazita, gljivica i alergena. Lokalizirani su uglavnom u bronhijima, submukoznoj koži, crijevima i želucu. Sudjelujte u stvaranju sekundarnog imuniteta. U slobodnom obliku u krvnoj plazmi praktično nema.
  • IgD je nepotpuno proučena frakcija. Vjeruje se da su ti uzročnici odgovorni za formiranje lokalnog imuniteta, počinju se proizvoditi tijekom pogoršanja kroničnih infekcija ili mijeloma. Manje od 1% udjela svih imunoglobulina u serumu.

Svi se oni mogu slobodno nalaziti u krvnoj plazmi i pričvrstiti na površinu zaraženih stanica. Prepoznavajući antigen, specifični proteini na njega se vežu pomoću repa. Služi kao svojevrsni signal za specijalizirane imunološke stanice koje su odgovorne za neutralizaciju stranih predmeta. Ovisno o tome kako proteini stupaju u interakciju sa antigenima, oni se dijele na nekoliko vrsta:

  • Antiinfektivno ili anti-parazitno - vežu se na tijelo patogenih mikroorganizama, što dovodi do njihove smrti.
  • Antitoksični - ne utječu na vitalnu aktivnost stranih tijela, već neutraliziraju toksine koje proizvode.
  • Autoantitijela - pokreću razvoj autoimunih poremećaja napadom zdravih stanica tijela domaćina.
  • Aloreaktivni - imunoglobulini koji se suprotstavljaju antigenima tkiva i stanica drugih organizama iste biološke vrste. Analiza za određivanje antitijela ove frakcije provodi se tijekom transplantacije (presađivanja) bubrega, jetre, koštane srži.
  • Izoantijela - specifični proteinski spojevi proizvode se protiv staničnih uzročnika drugih bioloških vrsta. Prisutnost antitijela u krvi onemogućava transplantaciju organa između evolucijski i imunološki sličnih vrsta (na primjer, transplantacija srca s čimpanze na ljude).
  • Antiidiotipski - proteinski spojevi dizajnirani da neutraliziraju višak vlastitih antitijela. Uz to, ova imunoglobulinska frakcija pamti strukturnu strukturu patogenih stanica protiv kojih je razvijeno izvorno antitijelo i reproducira ga kad strani agent ponovno uđe u krv.

Krvni test na antitijela

Suvremena metoda laboratorijske dijagnoze različitih bolesti je ispitivanje krvi ELISA (imunofluorescentna analiza). Ovaj test na antitijela pomaže odrediti titar (aktivnost) imunoglobulina, njihovu klasu i utvrditi u kojoj fazi razvoja je patološki proces. Metoda istraživanja sastoji se od nekoliko faza:

  1. Za početak, laboratorijski asistent dobiva od pacijenta uzorak biološke tekućine - krvni serum.
  2. Dobiveni uzorak stavlja se na posebnu plastičnu ploču s jažicama koje već sadrže pročišćene antigene željenog patogena ili proteina (u slučaju da antigen treba utvrditi).
  3. Jažicama se dodaje posebno bojilo koje u slučaju pozitivne enzimske reakcije mrlja imunološke komplekse.
  4. Prema gustoći bojenja, laboratorijski asistent donosi zaključak o rezultatima analize.

Za provedbu testa istraživačima će trebati jedan do tri dana. Sama studija je dvije vrste: kvalitativna i kvantitativna. U prvom se slučaju podrazumijeva da će se željeni antigen naći ili, naprotiv, u uzorku krvi. Kvantitativni test ima složeniju lančanu reakciju i pomaže u izvlačenju zaključaka o koncentraciji antitijela u pacijentovoj krvi, uspostavljanju njihove klase, procjeni koliko brzo se razvija infekcijski proces.

Zašto uzeti test na antitijela

ELISA test se provodi u različitim situacijama. Na primjer, posljednjih godina ova se tehnika aktivno koristi u eksperimentalnoj medicini za razvoj novih lijekova i u kliničkim ispitivanjima. Analiza prisutnosti antitijela u krvi mora biti propisana prije ili tijekom trudnoće kako bi se utvrdili proteinski spojevi koji su aktivni protiv TORCH infekcija (bolesti koje se prenose utero s majke na dijete):

  • toksoplazmoza;
  • rubeole;
  • citomegalovirusna infekcija;
  • herpes virus.

Rezultati ispitivanja pomažu u utvrđivanju učinkovitosti odabrane metode liječenja, utvrđivanju vrste virusa, njegove aktivnosti. U kliničkoj praksi, test ELISA propisan je za sljedeće indikacije:

  • Dijagnoza spolno prenosivih bolesti (SPB). Tu spadaju: klamidija, ureaplazmoza, mikoplazmoza, trihomonijaza, sifilis.
  • Određivanje patologija štitnjače ili drugih endokrinih žlijezda.
  • Dijagnoza virusnog hepatitisa C, B, D, A, E, AIDS-a ili HIV infekcije.
  • Određivanje alergena ili spojeva koji u slučaju trovanja, ugriza zmija ili insekata izazivaju intoksikaciju.
  • Određivanje vrste šećerne bolesti, otpornosti tkiva na inzulin.
  • Liječenje neplodnosti. Prisutnost antitijela ili spermatozoida u krvi postaje razlog nemogućnosti produktivne koncepcije.
  • Dijagnoza zaraznih bolesti koje se prenose kontaktnim, zračnim ili fekalno-oralnim putem - helmintičke invazije, difterija, tetanus, leptospiroza (bolest karakterizirana oštećenjem kapilara bubrega i jetre), ospicama, kozicom..
  • Dijagnoza ili liječenje raka, bolesti koštane srži.

Kako proći

Ovisno o načinu života, vrsti prehrane, psiho-emocionalnom stanju, sastav krvi bilo koje osobe neprestano se mijenja, stoga se prije početka istraživanja mora pridržavati određenog režima. Priprema traje 2-3 dana i zahtijeva poštivanje sljedećih pravila:

  • Potrebno je donirati krv za antitijela iz vene ujutro i to uvijek na prazan želudac. Ogradu provodi specijalista sa sterilnim instrumentima u bolnici.
  • Za dobivanje najtočnijih rezultata potrebno je 2 dana prije isporuke biološkog materijala izuzeti dimljenu, začinjenu, slanu i prženu hranu iz svakodnevne prehrane. U istom razdoblju preporučljivo je potpuno prestati pušiti, piti alkoholna pića ili droge koje sadrže alkohol, voćne sokove.
  • Ako analiza liječnika propisuje kako bi odredio vrstu spolno prenosive bolesti, dijagnosticirao helmintičku invaziju, hepatitis ili rubeolu, nekoliko dana treba prijeći na mliječnu dijetu.
  • Ne možete predati materijal za istraživanje nakon nedavnog emocionalnog šoka, podvrgnute fluorografiji, ultrazvuku, računalnoj ili magnetskoj rezonanci, fizioterapiji.

Dešifriranje krvnih pretraga na antitijela

U dijagnostičkom planu značajne su samo tri vrste imunoglobulina: IgM, IgG, IgA. Po njihovom odstupanju od norme, može se prosuditi o prisutnosti ili odsutnosti infekcije. Negativni rezultat analize nije apsolutni pokazatelj da je zarazni proces odsutan. To je zbog činjenice da nakon infekcije, formiranje lančane reakcije imuniteta traje neko vrijeme - od 2-3 dana do 2-3 tjedna. Da bi se potvrdio negativan rezultat, test ELISA mora se ponoviti nakon nekog vremena..

Prisutnost antitijela češće ukazuje da su u krvi alergeni, virusi, bakterije ili drugi mikroorganizmi. Štoviše, čak se i pozitivan rezultat ne smatra uvijek patologijom. Na primjer, stvaranjem dodatnih imunoglobulina tijelo može reagirati na nepravilno odabran tretman, začeće i transplantaciju organa. Rezultati studije pomažu u odgovoru na sljedeća pitanja:

  • koliko u potpunosti imunološki sustav reagira na infekciju, je li potrebno poduzeti dodatne mjere liječenja;
  • u kojoj je fazi progresije bolest;
  • Ima li osoba onkološke bolesti;
  • kako se odvija proces preživljavanja implantata;
  • koja je tvar uzrokovala razvoj alergija;
  • je li se dogodila infekcija virusima, parazitima, bakterijama i koliko dugo;
  • je li se pogoršala kronična bolest.

Imunoglobulin klase A jedan je od važnih za diferencijalnu dijagnozu. Stalno je prisutan u tijelu i čini otprilike 10-25% svih frakcija imunoglobulina. Referentne vrijednosti IgA mogu se razlikovati ovisno o dobi i spolu:

Krvni test na antitijela

Test antitijela

Ljudsko tijelo jedan je od najsloženijih sustava u kojem je sve povezano i komplementarno. Najčudesnije u ljudskom tijelu je da je i sam u stanju nositi se s brojnim bolestima.

Krvožilni sustav je u stanju reći o svim procesima koji se odvijaju u tijelu. Antitijela u krvi nastaju kada se pojave strane tvari poput virusa, bakterija ili alergena..

U ljudskoj krvi postoji više od milijun različitih antitijela, pojavljuju se mnogo ranije od patogena. Antitijela nastaju kombiniranjem različitih krvnih tijela i limfocita..

Oni su na zaštiti tijela. Ako se otkriju patogeni, odmah se počinje proizvoditi određena vrsta antitijela, koja će se izravno boriti protiv ove vrste infekcije..

Klasifikacija protutijela

Znanstvenici su otkrili i proučili neka antitijela, radi praktičnosti su označena određenim oznakama. Svaka skupina povezana je s određenim antigenima:

  1. IgM skupina - antitijela koja brzo reagiraju na infekcije u tijelu, ona su prva koja su izgradila barijeru zaštite. Veliki broj protutijela ove skupine u krvi ukazuje na početak bolesti.
  2. IgA skupina - antitijela koja također brzo reagiraju na bolesti, ali uglavnom na sluznici tijela. Velika količina takvih antitijela u krvi može ukazivati ​​na prisutnost akutnih respiratornih bolesti, bolesti kože i jetre.
  3. IgE skupina - te su molekule osjetljive na prisutnost bakterija i gljivica. Najvažnija skupina protutijela za trudnice, oni su odgovorni za razvoj snažnog imuniteta u buduće dijete.
  4. IgG skupina odgovorna je za razvoj upornog imuniteta i zaštitu od toksičnih učinaka..
  5. IgD skupina - prisutna je u krvi u maloj količini, još nije u potpunosti razjašnjena.

Analiza će pomoći u utvrđivanju širenja bolesti - gljivične, virusne ili bakterijske infekcije. Prema broju jedne ili druge vrste protutijela možete odrediti tok bolesti, u kojoj je fazi i kako se tijelo bori s njom.

Indikacije za darivanje krvi za antitijela

Propisana je slična analiza kako bi se utvrdilo stanje imuniteta, sa sustavnim bolestima, pa čak i u brojnim uvjetima.

Kome je dodijeljena slična analiza:

  • Pacijentu se sustavno dijagnosticira infekcija;
  • Pacijenti s onkologijom, alergijama i autoimunom bolešću;
  • U pripremi za operaciju;
  • Prije operacije transplantacije organa;
  • Tijekom razdoblja rehabilitacije tijela nakon ozbiljne bolesti;
  • Tijekom trudnoće;
  • Da biste odredili točnu dozu imunoglobulina.

Također, ova vrsta studije propisana je ako postoji sumnja na bolest s ospicama, rubeolom, hepatitisom. Analiza se koristi pri prvim simptomima zaraze virusima, helminthima, giardia, polio, herpes, ciroza, onkologija, HIV infekcija.

Kod kronične neplodnosti propisani su testovi za otkrivanje antitijela na spermu i hCG.

Potreba za ovim pregledom je razumljiva, nakon dobivanja rezultata liječnik može postaviti dijagnozu, propisati liječenje i prilagoditi dozu propisanog lijeka. Također će podaci analize pomoći u praćenju napretka bolesti ili zaustavljanju u početnoj fazi.

Priprema antitijela

Ako liječnik inzistira na darivanju krvi za antitijela, onda je to važno i ovo ispitivanje ne može zanemariti. Da biste postigli pouzdan rezultat, morate se pridržavati niza pravila:

  • Krv se uzima ujutro na prazan želudac (bilo kakva konzumacija hrane, vode i duhana);
  • Nekoliko dana prije toga trebate se pridržavati određene prehrane. Sve oštro, masno i slano treba isključiti iz prehrane. Minimizirana konzumacija alkohola i kave.
  • Izbjegavajte tečajeve fizičke aktivnosti i fizioterapije dnevno.
  • Ne darujte krv za antitijela ako pacijent uzima lijekove ili je upravo završio tečaj liječenja lijekovima.

Trudnoća i antitijela

Tijekom trudnoće krvni su testovi na antitijela od velike važnosti, posebno ako je rezusni faktor kod roditelja drugačiji. Posebno je važno pratiti antitijela ako trudnica ima rezusnu negativnu krvnu sliku i pozitivan otac na buduću bebu.

U takvim situacijama dijete često dobije očev Rh faktor, a ženino tijelo reagira na to brzim stvaranjem antitijela, što može dovesti do odbacivanja ploda.

Dolazi rezusni sukob, jer majčino tijelo uzima stvaranje i razvoj fetusa kao stranog organizma i počinje se boriti protiv njega.

Ponavljana trudnoća je najopasnija, jer se tijekom prve trudnoće u ženskom tijelu razvio veliki broj antitijela i oni se počinju boriti u punoj snazi..

Analiza na antitijela pokazuje njihovu veličinu, a liječnik određuje koliko treba propisati imunoglobulin da bi ih uništio..

rubeola

Rubella je vrlo opasna bolest za trudnicu i nerođeno dijete. Ovo je zarazna bolest koja izaziva razvoj malformacija fetusa, nepravilno formiranje njegovih organa. Pored rubeole u ranim fazama trudnoće, krv se nužno daruje i za infekcije bakljom.

Ako je rezultat pozitivan, smatraju se testovi koji mogu pokazati da je žena oboljela od ove bolesti i da je razvila dovoljno protutijela da se može boriti protiv ponovnog pojavljivanja bolesti..

Rezultati mogu pokazati da je žena neko vrijeme bolesna, s takvim ishodom je prikazan pobačaj, inače je rizik od urođenih abnormalnosti fetusa vrlo visok.

Herpes

Važna studija tijekom trudnoće je test antitijela na herpes. Sam herpes može živjeti u tijelu odrasle osobe bez uzrokovanja problema.

Tijekom trudnoće ovaj virus može imati nepopravljiv učinak na zdravlje nerođenog djeteta. Izaziva malformacije fetalnih organa i čak dovodi do pobačaja.

Giardia

Otkrivanje giardije pretragom krvi ne daje točnu sliku, jer će rezultat ostati pozitivan još dugo nakon tretmana. Glavna vrsta analize ostaje isporuka izmeta za giardiasis.

helminti

Jaja helminta teško je otkriti tradicionalnom metodom - isporukom stolice. Anthelmintska antitijela daju najtačniji rezultat testa, najbolje je uzeti analizu nekoliko puta. Ako je rezultat bio negativan pri prvoj isporuci, ponovite postupak nakon dva tjedna.

Hepatitis C

Pozitivan rezultat otkrivenih IgG antitijela ukazuje na to da pacijent ima hepatitis, stekao je kronični oblik ili bio u kontaktu s zaraženom osobom.

Pozitivan rezultat IgM protutijela ukazuje da je bolest u aktivnom stadiju. Pravovremenim otkrivanjem patogena možete točno dijagnosticirati i propisati učinkovit tretman koji će spriječiti razvoj bolesti.

Sifilis

Rana dijagnoza sifilisa u tijelu omogućuje vam propisati učinkovit tretman. Za otkrivanje sifilisa koristi se metoda otkrivanja nekoliko antitijela, ova metoda je uvijek točna.

Otkrivena su protutijela na IgG i IgM, prisutnost prvog ukazuje na kronični oblik bolesti, prisutnost drugog ukazuje na akutni oblik.

Tuberkuloza

Prvi test na tuberkulozu je rendgenski snimak. Nažalost, ne otkriva bolest uvijek. Postoje i vrste tuberkuloze koje se razvijaju izvan pluća..

Takvi oblici pomažu u otkrivanju protutijela na IgM i IgG. Dobro poznata Mantouxova reakcija sadrži skup ovih antitijela i pomaže u prepoznavanju bolesti učinkovito i u kratkom vremenu..

Zaključak

Analiza protutijela u krvi pomaže identificirati ogroman broj bolesti, kako u početnoj fazi, tako i u kroničnom obliku. Ovom metodom možete razjasniti dijagnozu koju je postavio liječnik prilikom određivanja vrste infekcije ili za cjelokupnu sliku stanja imunološkog sustava i propisati odgovarajući tretman.

Takva je studija posebno važna za trudnice, jer će pravovremeno otkrivanje bolesti pomoći u sprečavanju malformacija fetusa i održavanju trudnoće.

Najbolje je ako se testovi na antitijela u krvi rade tijekom planiranja trudnoće, tada će biti moguće provesti cjelovit tretman, a rizik od komplikacija tijekom ovog razdoblja značajno će se smanjiti.

Krvni test na antitijela dostupan je u mnogim laboratorijima, pri odabiru mjesta obratite pažnju na popis mogućih studija. Što je veća, laboratorij ima više mogućnosti i točniji će biti rezultati.

Cijena analiza u različitim laboratorijima malo će se razlikovati jer su potrošni materijali za studije isti.

Dešifriranje rezultata pregleda najbolje se daje liječniku jer se uzimaju u obzir različiti čimbenici - dob, spol, stanje pacijenta.

Antitijela na koronavirus: nade i stvarnost

Test na antitijela na koronavirus danas postaje opsesija i konačni san mnogih ljudi koji ostaju kod kuće. Ali eto, zimi je bilo sumnjivog kašlja, a SARS je nastavio točno kao blagi oblik COVID-19, a onda ostanite kod kuće, nosite masku, bojte se otići posjetiti svoju baku i patiti od tjelesne neaktivnosti! Ali jak organizam, sigurno da je to bilo "to". Ako je postojao tako magičan test koji bi pokazao da ste već bolesni i da sada niste zaštićeni samo od infekcije, nego ste sigurni i za druge. To vam omogućuje da napravite test na antitijela. Istina, s gomilom nijansi i rezervacija. Kako ova metoda funkcionira i zašto je s tim povezano puno nade i toliko dvojbi, shvatio je MedAboutMe.

Što su antitijela?

Da bi prepoznao i uništio stanice patogenih mikroorganizama, naš imunološki sustav proizvodi antitijela. Riječ je o prilično velikim proteinima plazme koji imaju oblik Y. Oni se međusobno razlikuju u područjima po kojima se vežu na proteine ​​na površini virusa, bakterija, gljivica i parazita. Nakon što se antitijela vežu, na primjer, na virusnu česticu, ili je sami uništavaju ili privlače druge specijalizirane stanice imunološkog sustava da pomognu. Antitijela se nazivaju i imunoglobulini, ukratko - Ig.

Ogromna većina imunoglobulina uključuje dva teška proteinska lanca i dva lagana. Neka antitijela su prisutna u krvnoj plazmi u obliku monomera - pojedinačnih proteina u obliku slova Y, a neka radije postoje u obliku dimera (kompleksa od dvije molekule) ili čak pentamera (od pet) ili heksamera (od šest molekula proteina).

Antitijela se proizvode od B-limfocita. Jedan B-limfocit može proizvesti samo jednu vrstu antitijela. Dakle, u ljudskom tijelu može biti najmanje milijun B-limfocita koji stvaraju različita antitijela.

B-limfociti formiraju specifične B-receptore pomoću kojih imunološke stanice određuju koji B-limfociti moraju biti aktivirani za stvaranje antitijela.

Vrste humanih antitijela

U sisavaca, odnosno kod ljudi, postoji 5 klasa antitijela koji su dobili ime po vrsti teških lanaca:

  • IgA - antitijela ove klase nalaze se uglavnom u tajnama našeg tijela. Oni se mogu naći u slini, sluzi koja se stvara u nosu, u majčinom mlijeku i u probavnom soku. U plazmi ih je relativno malo - samo 10-15% ukupnog volumena svih Ig. Ovo je naša prva linija obrane sluznice. IgA sam po sebi nema baktericidna svojstva, odnosno ne uništava bakterije, ali oni neutraliziraju toksine koje te bakterije proizvode. Također aktiviraju obrambeni imunološki odgovor tijela na invaziju virusa. Upravo IgA pružaju specifičan imunitet novorođenčadi koju dobivaju majčinim mlijekom.
  • IgE - svi oboljeli od alergije znaju za ta antitijela. Upravo ti Igovi imaju vodeću ulogu u razvoju alergijske reakcije, što je manifestacija preosjetljivosti imunološkog sustava. U osoba s alergijom IgE može biti 10 puta veći nego kod obične osobe. I IgE su odgovorni za imuni odgovor na gliste. Koncentracija IgE također se povećava s određenim autoimunim bolestima, poput psorijaze ili reumatoidnog artritisa.
  • IgM - ovo je vrlo zanimljiva klasa protutijela, relevantna u današnje vrijeme. Kad patogen uđe u tijelo, upravo se ti imunoglobulini formiraju. Ovo su najteži Ig od svih. Oni formiraju pentamere iz pet proteinskih molekula u obliku slova Y. Njihove varijabilne regije na viljušku izdignutog Y proteina uspoređuju se s nizom dijelova dizajnera iz kojih se može graditi bilo koja konfiguracija. Ova jedinstvena konfiguracija nastaje nakon kontakta IgM s površinskim proteinima virusa ili bakterija. Ako ima puno IgM u krvi osobe, na primjer, koronavirusom, to znači da je infekcija u ranoj fazi - osoba je bolesna.
  • IgD - imunoglobulini ove vrste u krvnoj plazmi su malo, oko 0,25% ukupnog volumena Ig. Znanstvenici vjeruju da IgD djeluje zajedno s IgM-om, dopunjavajući ih funkcionalno.
  • IgG su naša najvažnija antitijela u svjetlu pandemije koronavirusa. Antitijela ove klase u krvi ponajviše - 75%, a ovo je glavna vrsta imunoglobulina. Vežu se na patogene koji ulaze u tijelo i time dovode do njihove imobilizacije i aglutinacije. Kad IgG sjedi na površini virusa, bakterija, gljivica, ti agresori dolaze u vidno polje stanica imunološkog sustava fagocita, koje prepoznaju štetnika i uništavaju ga. IgG ne samo da definira neprijatelje, već pokreće sustav komplementa, što dovodi do stvaranja proteina potrebnih za uništavanje patogenih mikroorganizama. IgG također neutralizira toksine. Također se nalaze u majčinom mlijeku i mogu čak preći preko placente, pružajući djetetu zaštitu i prije rođenja i u prvim mjesecima života nakon njih. Prisutnost IgG za specifičnu infekciju u krvnoj plazmi ukazuje na to da se tijelo nije susrelo samo s infektivnim agensom, već je i naučilo kako se nositi s njim.

Dakle, enzimski imuno test (ELISA) analizira prisutnost antitijela IgM i IgG. Ako u krvnoj plazmi postoje samo protutijela na IgM, to znači da je osoba nedavno postala bolesna i trenutno je bolesna. Ako postoje i IgM i IgG, to znači da je borba protiv infekcije u punom jeku i imunološki sustav već proizvodi antitijela potrebna za uništavanje virusa ili bakterija. Ako se u krvnoj plazmi utvrdi samo IgG, to znači da je infekcija bila, ali tijelo ju je uspješno pobijedilo, izliječeno je, ali još uvijek pamti kako se nositi s njom.

Za one koji se pitaju koliko varijacija antitijela mogu postojati i da li te varijante završavaju tijekom života jedne osobe, odredimo da DNK koja kodira varijabilna područja antitijela sadrži 400 varijabilnih gena, 12 gena raznolikosti i 4 gena koji se povezuju., U različitim kombinacijama omogućuju vam kodiranje više od 200 tisuća sorti varijabilnih područja. A to je osim promjena u nukleotidima samih gena. Prema znanstvenicima, ljudsko tijelo može proizvesti 100 milijuna različitih antitijela koja mogu prepoznati gotovo bilo koju postojeću tvar koja nam je strana. To je dovoljno za oči bilo koga, pa i osobe koja je vrlo aktivno u kontaktu s infekcijama.

Koronavirusni testovi

Kad se pandemija tek počela, glavna ideja bila je identificirati ljude zaražene koronavirusom. Stoga je najvažnije bilo stvaranje testa koji vam omogućuje da odredite RNA virusa u ljudskoj sekreciji. Koncentracija koronavirusa u slini i sluzi iz nazofarinksa mnogo je veća nego u krvi, tako da je bris iz nosne šupljine uzet za istraživanje, a ne krv iz prsta.

Sada je poznato da je češće infekcija SARS-CoV-2 asimptomatska. Međutim, još uvijek postoje kategorije stanovništva za koje koronavirusna infekcija može postati kobna. Stoga je tako važno shvatiti tko danas, prvo, neće se razboliti, a drugo, neće postati skriveni izvor zaraze ljudima u riziku. I sada su testovi na antitijela na koronavirus došli do izražaja.

Kao što je gore spomenuto, glavni interes predstavljaju protutijela na IgG. Djelomično je dijagnosticirati bolest ELISA-om. Protutijela na IgM ne pojavljuju se odmah, već tijekom prvih dana bolesti. Međutim, ako osoba nema simptoma, ali ima protutijela na IgM, to ukazuje na asimptomatski tijek bolesti.

Sa IgG antitijelima također nije lako. Pojavljuju se, prema CDC-u, 1-3 tjedna nakon infekcije. Dakle, ovaj je test relevantan za one koji su imali koronavirus (ili nešto vrlo slično njemu) barem nekoliko tjedana.

Puno ste čitali, a mi to cijenimo!

Ostavite svoju e-poštu da uvijek prima važne informacije i usluge za održavanje svog zdravlja

Znanost! Kako se virus zarazi i kako reagira imunološki sustav

Virusi su vrlo zanimljiva stvorenja. Oni nemaju ćelije, s gledišta znanosti ne smatraju se živima... a znanost još uvijek ne može točno reći što je to.
Sve o virusima je vrlo teško! Prema tome, svjedoci smo takvog nemira!
Da biste to shvatili na minimum, morate barem znati sljedeće pojmove:
1) deoksiribonukleinska kiselina;
2) ribonukleinska kiselina;
3) kapsid;
4) receptore i jezgre receptora;
5) membrana;
6) veza s ključem za zaključavanje;
7) integraza;
8) proteaza;
9) reverzna transkriptaza;
10) domena;
11) transkripcija;
12) glasnik;
13) citoplazma;
14) replikacija;

Virusi se množe u stanici. Ali svaki se virus specijalizira za određene stanice!
Dakle, HIV inficira T-limfocite, Gripa inficira epitel larinksa i pluća, koronavirus inficira epitel gornjih dišnih putova, pluća i gastrointestinalnog trakta, Herpes utječe na živce i uzrokuje neuroinfekciju, hepatitis inficira stanice jetre itd..
Kako virus ulazi u stanicu:


Oni. Jednom kada virus uđe u stanicu tijela, pretvara se u tvornicu za proizvodnju novih virusa.

Kako reagira imunološki sustav? Obično, ako je malo virusa, tada zaražene stanice uspijevaju uništiti limfocite i prirodne ubojice..
Ali ako je doza virusa velika ili je imunitet oslabljen zbog stresa zbog odljeva ležišta tijekom krize na tržištima, tada ova tvornica virusa uspješno započinje!

Ali nije sve tako loše! Tijelo ima alarm! Ako virus uđe u stanicu, tada stanica počinje inducirati i bacati posebne proteine ​​interferona oko sebe. Ti proteini daju signal susjednim stanicama i stanice blokiraju njihove membrane, sprečavajući da virusi uđu u sebe. Imunološkim stanicama daje se signal da nešto nije u redu i morate započeti s radom.
Što se tiče interferona, ovdje je sve vrlo komplicirano:

Pored toga, posebne imunoglobulinske stanice, B-limfociti, počinju proizvoditi specifične imunoglobuline (obično se nazivaju antitijela), koji blokiraju proteine ​​virusa, pretvarajući ih u bespomoćne mete makrofaga.

Imunoglobulini klase A, M, G (IgA, IgM, IgG) ili antitijela - proteini koje stvara imunološki sustav tijela kao odgovor na unošenje bakterija, virusa, gljivica i drugih stranih uzročnika (antigena).

Antitijela su specifična i proizvode se za svaki specifični antigen. Proizvodnja imunoglobulina popraćena je alergijskom reakcijom. Kod autoimunih bolesti protutijela se stvaraju na vlastitim tkivima..

Postoji pet klasa protutijela od kojih su najveća dijagnostička vrijednost IgA, IgG i IgM..

IgA protutijela sintetiziraju se u respiratornom traktu, gastrointestinalnom traktu, vagini i drugim organima. Ta antitijela štite tijelo od invazije stranih uzročnika izvana. Imunoglobulini klase A čine 10-15% svih protutijela. Kod malog broja ljudi, protutijela na IgA se ne proizvode - selektivni deficit imunoglobulina A.

IgM protutijela nalaze se u krvi i limfnoj tekućini. Kad antigen uđe, u prvom redu se proizvode imunoglobulini M. Razina IgM protutijela je 5-10%.

IgG antitijela se nalaze u svim tjelesnim tekućinama. Oni su najmanja, ali najčešće protutijela (oko 75-80% svih imunoglobulina u tijelu). Samo protutijela IgG mogu prodrijeti kroz placentu trudnice i, prema tome, zaštititi fetus - do otprilike 6. mjeseca starosti.

Niska razina imunoglobulina može ukazivati ​​na nedostatak imunološkog sustava. Povećana količina imunoglobulina može se proizvesti u multiplom mijelomu (IgG, IgA), makroglobulinemiji (IgM), primarnoj sistemskoj amiloidozi i drugim stanjima.
Kako djeluju antitijela:

Obično sve izgleda ovako:

Nakon što ste stvorili dovoljno IgG antitijela, sada imate dugoročnu imunost od virusa!
Obično je potrebno tijelu 10-14 dana! Ako niste umrli u prvih 5-8 dana, onda imate dobre šanse za oporavak!
(iznimka - ljudi oboljeli od AIDS-a, ovisnici o drogama, alkoholičari, gladni ljudi, kao i osobe koje žive u nepovoljnim okolišnim uvjetima)

Sada se nadam da svi razumiju zašto imamo toliko ljudi koji su se oporavili od koronavirusa i zašto su svi u karanteni točno 2 tjedna?

Protutijela na protutijela. Kako provjeriti jeste li imuni na koronavirus

Iskreno čudna izjava „koronavirus je lažni“ zamijenjena je drugom, ne manje optimističnom - „Već sam se razbolela“. Većina ljudi koji nisu ni otišli u inozemstvo i nisu imali kontakt s oboljelima nadala se duboko u sebi da je „taj dugotrajni bronhitis zimi blagi koronavirus“. Danas je bila prilika da se to sigurno sazna.

"Imate li trenutno koronavirus, to možete saznati pomoću PCR studije (a za to morate napraviti bris iz orofarinksa)", kaže Elena Chashikhina, voditeljica kliničke dijagnostičke laboratorije INVITRO-Moskva. - Da biste otkrili jeste li se već susreli s virusom prije, potrebno je darivati ​​krv za provođenje ispitivanja imunogorbensa povezanog s enzimom (ELISA), koje će pokazati imate li protutijela (imunoglobulini, Ig) na koronavirus.

Antitijela dolaze u različitim klasama. Visoka razina protutijela klase M (IgM) ukazuje na to da je koronavirusna infekcija u tijelu prisutna ili je bila u bliskoj prošlosti (ta se antitijela proizvode u prosjeku tjedan dana nakon što virus napadne organizam, a obično nestanu nakon tri mjeseca). Povišena razina protutijela klase G (IgG) znak je da je osoba već prenijela COVID-19, što znači da može biti imun na tu bolest. ".

Ako PCR studija može biti spremna tek sljedeći dan (to je idealno, ali u praksi, kao što već znamo, pacijenti moraju na rezultate testova čekati više od tjedan dana, jer pozitivni testovi zahtijevaju dugu provjeru), zatim ekspresni test antitijela ( što će pokazati samo činjenica njihove prisutnosti) traje 15-30 minuta. Potpuna studija koja može pokazati razinu antitijela u određenim jedinicama - pokazatelj napetosti (snage) imuniteta - zahtijeva duže vrijeme, barem oko dva sata.

Samo SARS

Koliko su opravdane nade da su neki stanovnici naše zemlje već prenijeli koronavirus u asimptomatskom obliku?

Kako bi se odgovorilo na ovo pitanje, provedeno je istraživanje volontera o prisutnosti imuniteta na koronavirus..

"Izmjerili smo razinu protutijela u različitim skupinama ljudi: onima koji su otpušteni iz bolnice nakon liječenja koronavirusnom infekcijom, ljudima koji su imali upalu pluća prilikom testiranja negativnih na COVID-19, i dobrovoljcima za koje su mislili da su prenijeli virus prije kako su se metode njegove dijagnoze pojavile svima ", objašnjava Andrey Isaev, voditelj Centra za molekularno-genetska istraživanja DNOCOM-a. - Sudionici studije ispunili su upitnike kako bismo mogli analizirati kako se koncentracija antitijela na koronavirus mijenja tijekom vremena i razumjeti kako uporni imunitet daje bolest.

Nažalost, rezultati nisu prijali istraživačima. Antitijela na koronavirus pronađena su u samo dva dobrovoljca. Jedan od njih bio je kontakt (infekcija coronavirusom dijagnosticirana je u njegovoj obitelji), drugi je pretrpio upalu pluća s tipičnom slikom mraznog stakla na CT snimci.

Čini se da su jedinice danas imune na koronavirus. ".

Najneugodnije otkriće bilo je da je, kako se ispostavilo, titar antitijela u krvi kod ljudi koji su podvrgnuti kovidu u blagom i asimptomatskom obliku prilično nizak. To može značiti da je razvijen samo kratkotrajni imunitet na koronavirusnu infekciju, koja može zaštititi od ponovne infekcije samo u tekućoj sezoni. Međutim, znanstvenici se, poput svih nas, nadaju da ta pretpostavka nije potvrđena

Međutim, nema smisla unositi imunološke putovnice (koje neke zemlje namjeravaju izdati ljudima koji su imali koronavirus za nesmetano kretanje kako u zemlji, tako i širom svijeta).

Dokazano da vjeruje?

Koliko su pouzdani testovi na antitijela na koronavirus? Doista, PCR dijagnostika se toliko kompromitirala da je čak i ministar zdravstva Mihail Muraško bio prisiljen priznati: računalna tomografija pluća jedina je pouzdana metoda dijagnosticiranja koronavirusne infekcije..

"Pod pouzdanošću u laboratorijskoj dijagnostici mislimo na kliničku specifičnost (postotak negativnih rezultata dobivenih kod očito zdravih ljudi) i osjetljivost (postotak pozitivnih rezultata dobivenih kod očito bolesnih osoba s potvrđenom dijagnozom) testa", objašnjava Chashchina. - Problem PCR dijagnostike nije specifičnost ili osjetljivost (čine 95-97%), već najčešće ili greške u preanalizi (to jest, bris je uzet netočno, s oštećenjima, postavljen u pogrešnu epruvetu za prijevoz u laboratorij) ili u upotrebu nepotvrđeni test sustavi. Primjerice, bris se vrši samo iz nazofarinksa, ali virus ostaje na ovoj lokalizaciji 2-3 dana, nakon čega pada niže, pa je orofarinks specifičnija lokacija za uzimanje brisa. Razmaz koji se uzima samo iz nazofarinksa može doći negativno..

Što se tiče ELISA studije, ovdje je specifičnost i osjetljivost veća od 95%. Stoga, ako u krvi postoje antitijela, onda ih je najvjerojatnije detektirati. ".

antitijela

Naše tijelo nije nimalo obranjeno od gomile bakterija, virusa, protozoja i drugih utjecaja. Tijekom stoljeća naučio se nositi s "neprijateljima" koji pokušavaju ući unutra. Obrana tijela naziva se imunitet. Imunitet je podijeljen na stanični i humoralni. Antitijela su glavni "vojnici" humoralnog imuniteta..

Što su antitijela i njihove vrste

Antitijela su proteini krvnog seruma (imunoglobulini - Ig) i druge biološke tekućine koje nastaju kao odgovor na unošenje stranih organskih tvari (antigena). Antitijela imaju sposobnost interakcije s antigenima koji su uzrokovali njihovo stvaranje. Nakon kombiniranja s antitijelom, antigen se uklanja iz tijela. Pojava antitijela u krvi pacijenta protiv uzročnika određene infekcije ukazuje na stvaranje imuniteta na ovu infekciju, a količina antitijela ukazuje na njegovu napetost..

Razlikovati između punih i nepotpunih antitijela. Kompletna antitijela u kombinaciji s antigenima daju vidljive reakcije (koagulacija u obliku pahuljica). Nepotpuna antitijela (na primjer, antitijela na Rh faktor krvi) ne daju takve reakcije, otkrivaju se drugim metodama.

Prirodna antitijela stvaraju se u ljudskim krokodilima nakon kontakta s bakterijama (ali bolest se ne pojavljuje). Tako, na primjer, pojedinačni imunitet na određene infekcije nastaje u kontaktu s pacijentima. Protutijela se proizvode i za uvođenje cjepiva koja sadrže komponente bakterija ili virusa..

imunoglobulini

Imunoglobulini su proteini u krvi koji imaju aktivnost antitijela, čine otprilike trećinu svih proteina u serumu, a njihov se broj povećava nakon ulaska antigena u organizam. Antitijela mogu pripadati bilo kojoj od pet klasa imunoglobulina: IgA, IgG, IgM, IgD, IgE.

Imunoglobulin G je glavna klasa protutijela koja čini oko dvije trećine svih serumskih imunoglobulina. Nakon početne primjene antigena, formira se kasnije od IgM protutijela, ali nakon opetovane primjene antigena, i ranije. IgG je jedina klasa protutijela koja mogu prelaziti kroz placentu i pružiti imunološku zaštitu fetusa. Zbog visokog sadržaja seruma, IgG je od najveće važnosti u anti-infektivnom imunitetu, pa se o učinkovitosti cijepljenja prosuđuje njegovom prisutnošću u krvnom serumu.

Količina imunoglobulina M u krvnom serumu je manja, otprilike jedna desetina svih imunoglobulina. Antitijela ove klase nastaju kada prvi antigen uđe u tijelo..

Imunoglobulin A čini otprilike jednu sedmu svih serumskih imunoglobulina. Može postojati u slini, suznim tekućinama, nosnim i bronhijalnim izlučevinama, na površini sluznice gastrointestinalnog trakta u obliku sekretornog imunoglobulina otpornog na učinke enzima. IgA sprečava ulazak mikroorganizama tamo gdje oni najčešće ulaze u tijelo. Količina IgA povećava se s respiratornim bolestima, na primjer, s bronhijalnom astmom.

Imunoglobulin E se nalazi u serumu u vrlo malim količinama. Vrlo je aktivan u odnosu na vlastite stanice u ljudskom tijelu, njegova interakcija s takvim stanicama izaziva oslobađanje histamina (glavne komponente alergijskih reakcija) i razvoj neposredne vrste alergijske reakcije (od urtikarije do anafilaktičkog šoka).

Imugoglobulin D se nalazi i u malim količinama u krvi.

Kako se stvaraju antitijela

Proizvodnja antitijela kao odgovor na unos antigena u organizam ovisi o tome da li se tijelo prvi ili više puta susreće s tim antigenom. Na početnom sastanku protutijela se ne pojavljuju odmah, ali nakon nekoliko dana u isto vrijeme prvo se formiraju IgM protutijela, a zatim počinju prevladavati IgG antitijela. Broj antitijela u krvi dostiže svoj vrhunac za otprilike tjedan dana, a zatim se njihov broj polako smanjuje.

Uz opetovani ulazak antigena u tijelo, stvaranje antitijela događa se brže i u većem volumenu, s tim da se IgG antitijela odmah formiraju. Imuni sustav je u stanju pamtiti svoje susrete s nekim antigenima jako dugo, to objašnjava, na primjer, cjeloživotni imunitet na male boginje ili dječje infekcije..

Što je imuni serum

Antitijela koja sadrže serume nazivaju se imuni serumi. Oni se široko koriste za liječenje i sprječavanje zaraznih bolesti. Osobito je učinkovita upotreba antitoksičnih antitijela koja djeluju u interakciji s toksinima (otrovima) bakterija. Primjer takvih seruma je davica i tetanusni serum..

Antitijela su naši zaštitnici koji sprječavaju da bakterije i virusi slobodno uđu u naše tijelo..

Galina Romanenko
"Ženski časopis za žensko zdravlje Womenhealthnet"

Protutijela

Antitijela su bjelančevine globulinske frakcije ljudskog krvnog seruma i toplokrvne životinje koje se formiraju kao odgovor na unošenje različitih antigena (bakterija, virusa, proteinskih toksina itd.) U tijelo i posebno u interakciji s antigenima koji su ih prouzrokovali. Vezujući se na aktivna mjesta (centre) s bakterijama ili virusima, antitijela sprečavaju njihovu reprodukciju ili neutraliziraju otrovne tvari koje se oslobađaju. Prisutnost antitijela u krvi ukazuje na to da je tijelo komuniciralo s antigenom protiv bolesti koju uzrokuje. U kojoj mjeri imunitet ovisi o antitijelima i u kojoj mjeri protutijela samo prate imunitet, odlučuje se u odnosu na određenu bolest. Određivanje razine antitijela u krvnom serumu omogućava nam prosuđivanje intenziteta imuniteta čak i u onim slučajevima kada antitijela ne igraju presudnu zaštitničku ulogu.

Zaštitni učinak antitijela sadržanih u imunološkim serumima široko se koristi u liječenju i prevenciji zaraznih bolesti (vidjeti Seroprofilaksa, Seroterapija). Reakcije antitijela s antigenima (serološke reakcije) koriste se u dijagnostici različitih bolesti (vidjeti Serološke studije).

Sadržaj

Priča

Dugo o kemijskoj. priroda A. znala je vrlo malo. Poznato je da se antitijela nakon davanja antigena nalaze u krvnom serumu, limfi, ekstraktima tkiva i da posebno reagiraju sa svojim antigenom. Prisutnost antitijela procijenjena je na temelju onih vidljivih agregata koji nastaju nakon interakcije s antigenom (aglutinacija, taloženje) ili promjenom svojstava antigena (neutralizacija toksina, liza stanica), ali gotovo ništa nije poznato na koji je kemijski supstrat antitijela.

Zahvaljujući primjeni ultracentrifugiranja, imuno-elektroforeze i pokretljivosti proteina u izoelektričnom polju, dokazano je da antitijela pripadaju klasi gama globulina ili imunoglobulina.

Antitijela su normalni globulini koji su formirani tijekom sinteze. Imuni globulini dobiveni imuniziranjem različitih životinja s istim antigenom i kada imuniziranje iste životinjske vrste s različitim antigenima imaju različita svojstva, baš kao što i serumski globulini različitih životinjskih vrsta nisu isti.

Klase imunoglobulina

Imunoglobuline proizvode imunokompetentne stanice limfoidnih organa, razlikuju se u molekularnoj težini, konstanti sedimentacije, elektroforetskoj pokretljivosti, sadržaju ugljikohidrata i imunološkoj aktivnosti. Postoji pet klasa (ili vrsta) imunoglobulina:

Imunoglobulini M (IgM): molekularna masa oko 1 milion, ima složenu molekulu; prvi se pojavljuju nakon imunizacije ili antigenske stimulacije, štetno djeluju na mikrobe koji uđu u krvotok, doprinose njihovoj fagocitozi; slabiji od imunoglobulina G, vežu topive antigene, bakterijske toksine; uništavaju se u tijelu 6 puta brže od imunoglobulina G (na primjer, u štakora je poluživot imunoglobulina M 18 sati, a imunoglobulina G 6 dana).

Imunoglobulini G (IgG): molekularna težina od oko 160.000, smatraju se standardnim ili klasičnim antitijelima: lako prolaze kroz placentu; formira se sporije od IgM; najučinkovitije se vežu topljivi antigeni, posebno egzotoksini, kao i virusi.

Imunoglobulini A (IgA): molekularna težina od oko 160.000 ili više, proizvodi se limfoidnim tkivom sluznica, inhibira razgradnju enzima tjelesnih stanica i odupire se patogenim učincima crijevnih klica, lako prodire u stanične barijere tijela, sadrži se u kolostrumu, slini, suzama, crijevnoj sluzi, znoj, odvojen nosom, u krvi se nalazi u manjim količinama, lako se povezuje sa stanicama tijela; IgA se pojavio, čini se, u procesu evolucije kako bi zaštitio sluznicu od agresije bakterija i prenio pasivni imunitet potomstvu.

Imunoglobulini E (IgE): molekulska masa oko 190 000 (prema R. S. Nezlin, 1972); očito su to alergijska antitijela - tzv. reakcije (vidi dolje).

Imunoglobulini D (IgD): molekulska masa oko 180 000 (prema R. S. Nezlin, 1972); o njima se trenutno vrlo malo zna.

Struktura antitijela

Imunoglobulinska molekula sastoji se od dvije neidentične polipeptidne podjedinice - laki (L - od engleskog svjetla) lanci molekulske težine 20 000 i dva teška (H - iz engleskog teška) lanca molekulske mase 60 000. Ovi lanci, povezani disulfidnim mostovima, tvore glavni monomer LH. Međutim, u slobodnom stanju se takvi monomeri ne javljaju. Većina molekula imunoglobulina sastoji se od dimera (LH)2, ostatak je iz polimera (LH)2n. Glavne N-terminalne aminokiseline ljudskog gama globulina su aspartanska i glutaminska, a zečja - alanin i asparaginska kiselina. Porter (RR Porter, 1959.), djelujući na imunoglobuline papaina, otkrio je da se oni raspadaju na dva (I i II) Fab fragmenta i Fc fragment (III) sa konstantom sedimentacije od 3,5 S i molekulskom masom od oko 50 000. ugljikohidrati vezani za Fc fragment. Na prijedlog stručnjaka WHO-a ustanovljena je sljedeća nomenklatura fragmenata antitijela: Fab fragment - monovalentni, aktivno se povezuje s antigenom; Fc fragment - ne stupa u interakciju s antigenom i sastoji se od polovice C-terminala teških lanaca; Fd fragment je mjesto teškog lanca koje je dio Fab fragmenta. Predloženi je fragment hidrolize pepsina 5S da se označi kao F (ab)2, a monovalentni 3,5S fragment je Fab.

Specifičnost antitijela

Jedno od najvažnijih svojstava antitijela je njihova specifičnost, koja se izražava u činjenici da protutijela aktivnije i cjelovitije stupaju u interakciju s antigenom na koji je tijelo stimulirano. Komplet antigen-antitijelo u ovom slučaju ima najveću snagu. Antitijela mogu razlikovati manje promjene u strukturi antigena. Kada se koriste konjugirani antigeni koji se sastoje od proteina i uključene jednostavne kemijske tvari - haptena, rezultirajuća antitijela specifična su za hapten, protein i kompleks proteina-hapten. Specifičnost nastaje zbog kemijske strukture i prostornog obrasca antideterminanta antitijela (aktivnih centara, reaktivnih skupina), odnosno dijelova antitijela kojima se oni povezuju s determinantama antigena. Broj anti-determinanti antitijela često se naziva njihova valencija. Dakle, molekula IgM antitijela može imati do 10 valencija; molekule IgG i IgA antitijela su dvovalentne.

Prema Karashu (F. Karush, 1962), aktivni IgG centri sastoje se od 10–20 aminokiselinskih ostataka, što je otprilike 1% svih aminokiselina u molekuli antitijela, a prema Winkleru (M. N. Winkler, 1963), aktivni centri se sastoje od od 3-4 aminokiselinskih ostataka. U njihovom sastavu pronađeni su tirozin, lizin, triptofan i dr. Antideedeterminanti su očito smješteni u amino-terminalnim polovicama Fab fragmenata. Promjenjivi segmenti lakih i teških lanaca uključeni su u stvaranje aktivnog centra, pri čemu potonji igra glavnu ulogu. Možda je laki lanac samo djelomično uključen u stvaranje aktivnog središta ili stabilizira strukturu teških lanaca. Najcjelovitiji antideterminant stvara se samo kombinacijom lakih i teških lanaca. Što je više podudaranja među antideterminantima antitijela i determinantama antigena, veća je specifičnost. Različita specifičnost ovisi o slijedu aminokiselinskih ostataka u aktivnom centru antitijela. Kodiranje ogromnog broja antitijela po njihovoj specifičnosti nije jasno. Porter omogućuje tri mogućnosti specifičnosti.

1. Formiranje stabilnog dijela molekule imunoglobulina kontrolira jedan gen, a varijabilni dio tisuće gena. Sintetizirani peptidni lanci kombiniraju se u molekulu imunoglobulina pod utjecajem posebnog staničnog faktora. Antigen u ovom slučaju djeluje kao faktor koji pokreće sintezu antitijela.

2. Molekula imunoglobulina kodirana je stabilnim i varijabilnim genima. U razdoblju stanične diobe dolazi do rekombinacije varijabilnih gena, što određuje njihovu raznolikost i varijabilnost dijelova molekula globulina.

3. Gen koji kodira varijabilni dio molekule imunoglobulina oštećen je određenim enzimom. Ostali enzimi popravljaju štetu, ali zbog pogrešaka dopuštaju različitu sekvencu nukleotida unutar određenog gena. To je zbog različitog niza aminokiselina u varijabilnom dijelu molekule imunoglobulina. Na primjer, postoje i druge hipoteze. Burnet (F. M. Burnet, 1971).

Heterogenost (heterogenost) antitijela očituje se na mnogo načina. Kao odgovor na primjenu jednog antigena, stvaraju se antitijela koja se razlikuju u afinitetu prema antigenu, antigenim determinantima, molekularnoj težini, elektroforetskoj pokretljivosti i N-terminalnim aminokiselinama. Grupna antitijela na razne mikrobe uzrokuju unakrsne reakcije na različite vrste i vrste salmonele, šigele, ešerihije, životinjske proteine, polisaharide. Proizvedena antitijela su heterogena po svojoj specifičnosti u odnosu na homogeni antigen ili jedinstvenu antigenu odrednicu. Primjećena je heterogenost antitijela ne samo protiv proteina i polisaharidnih antigena, već i protiv složenih, uključujući konjugirane, antigene i protiv haptena. Vjeruje se da je heterogenost antitijela određena poznatom mikroheterogenošću antigenskih determinanti. Heterogenost može biti uzrokovana stvaranjem antitijela na kompleks antigen-antitijelo, što se opaža tijekom opetovane imunizacije, razlike u stanicama koje tvore protutijela, a također i pripadnosti antitijela različitim imunoglobulinama, koji poput ostalih proteina imaju složenu genetski kontroliranu antigenu strukturu.

Vrste protutijela

Kompletna antitijela imaju najmanje dva aktivna centra i, u kombinaciji s antigenima in vitro, izazivaju vidljive reakcije: aglutinacija, taloženje, vezivanje komplementa; neutralizirati toksine, viruse, opsonizirati bakterije, uzrokovati vizualni fenomen imunološke adhezije, imobilizacija, oticanje kapsule, opterećenje trombocita. Reakcije se odvijaju u dvije faze: specifičnoj (interakcija antitijela s antigenom) i nespecifičnoj (jedna ili druga od gore navedenih pojava). Općenito je poznato da su različite serološke reakcije određene jednim, a ne više antitijela, a ovise o tehnici formulacije. Postoje termička cjelovita antitijela koja reagiraju s antigenom na t ° 37 °, i hladna (kriofilna), koja pokazuju učinak na t ° ispod 37 °. Postoje i antitijela koja reagiraju s antigenom na niskoj temperaturi, a vidljivi učinak se očituje na t ° 37 °; to su dvofazna, biotermalna antitijela kojima su dodijeljeni Donat - Landsteiner-ovi hemolizini. Sve poznate klase imunoglobulina sadrže kompletna antitijela. Njihova aktivnost i specifičnost određeni su titrom, avidnošću (vidi Avidity) i brojem antideterminanta. IgM protutijela su aktivnija od IgG antitijela u reakcijama hemolize i aglutinacije.

Nepotpuna antitijela (ne taloženje, blokiranje, aglutinoidi), poput cjelovitih antitijela, mogu se povezati s odgovarajućim antigenima, ali reakcija nije praćena fenomenom taloženja, aglutinacije itd., Vidljivih in vitro.

Nekompletna antitijela pronađena su 1944. godine kod ljudi protiv Rh antigena, pronađena su u virusnim, rikettijalnim i bakterijskim infekcijama s obzirom na toksine u različitim patološkim stanjima. Postoje dokazi o raznolikosti nepotpunih antitijela. Bakterijska nepotpuna antitijela imaju zaštitna svojstva: antitoksična, opsonizujuća, bakteriološka; istodobno su pronađena nepotpuna antitijela u nizu autoimunih procesa - s krvnim bolestima, posebno hemolitičkom anemijom.

Nepotpune hetero-, izo- i autoantitijela mogu prouzrokovati oštećenje stanica, a također igraju ulogu u nastanku leuko- i trombocitopenije.

Antitijela koja se često nalaze u krvnom serumu životinja i ljudi u nedostatku jasne infekcije ili imunizacije smatraju se normalnim (prirodnim) protutijelima. Podrijetlo antibakterijskih normalnih protutijela može biti povezano, posebno, s antigenom stimulacijom normalne mikroflore u tijelu. Ova su stajališta teorijski i eksperimentalno utemeljena studijama životinjskih gnotobionata i novorođenčadi u normalnim životnim uvjetima. Pitanje funkcija normalnih antitijela izravno je povezano sa specifičnošću njihovog djelovanja. L. A. Zilber (1958) vjerovao je da se individualna otpornost na infekcije i, osim toga, "imunogena spremnost tijela" određuju njihovom prisutnošću. Prikazana je uloga normalnih antitijela u baktericidnoj aktivnosti krvi, u opsonizaciji tijekom fagocitoze. Rad mnogih istraživača pokazao je da su normalna antitijela uglavnom makroglobulini - IgM. Neki su istraživači otkrili normalna antitijela u IgA i IgG razredima imunoglobulina. Oni mogu sadržavati ili nepotpuna ili potpuna antitijela (normalna antitijela na crvene krvne stanice - vidi Krvne grupe).

Sinteza antitijela

Sinteza antitijela odvija se u dvije faze. Prva faza je induktivna, latentna (1-4 dana), u kojoj se antitijela i stanice koje stvaraju antitijela ne otkrivaju; druga faza je produktivna (započinje nakon induktivne faze), antitijela se nalaze u plazma stanicama i tekućina koja teče iz limfoidnih organa. Nakon prve faze stvaranja antitijela počinje vrlo brza brzina rasta antitijela, često se njihov sadržaj može udvostručiti svakih 8 sati ili čak brže. Maksimalna koncentracija različitih antitijela u krvnom serumu nakon jedne imunizacije zabilježena je 5., 7., 10. ili 15. dana; nakon ubrizgavanja deponovanih antigena - 21. ili 45. dana. Tada nakon 1-3 mjeseca ili više, titri protutijela naglo padaju. Međutim, ponekad se niska razina protutijela nakon imunizacije bilježi u krvi nekoliko godina. Utvrđeno je da primarna imunizacija s velikim brojem različitih antigena prati pojavu u početku teških IgM (19S) protutijela, zatim nakratko - IgM i IgG (7S) protutijela i, na kraju, neka lagana 7S antitijela. Višekratna stimulacija osjetljivog organizma antigenom ubrzava stvaranje obje klase antitijela, skraćuje latentnu fazu stvaranja antitijela, vrijeme sinteze 19S protutijela i potiče preferencijalnu sintezu 7S antitijela. Često se antitijela 19S uopće ne pojavljuju.

Utvrđene razlike između induktivne i produktivne faze stvaranja antitijela utvrđene su proučavanjem njihove osjetljivosti na brojne utjecaje, što je od temeljnog značaja za razumijevanje prirode specifične profilakse. Na primjer, poznato je da izlaganje prije imunizacije odgađa ili u potpunosti inhibira stvaranje antitijela. Zračenje u reproduktivnoj fazi stvaranja antitijela ne utječe na sadržaj antitijela u krvi.

Izolacija i pročišćavanje antitijela

Kako bi se poboljšala metoda izolacije i pročišćavanja antitijela, predloženi su imunosorbenti. Metoda se temelji na pretvorbi topljivih antigena u netopljivi spajanjem kroz kovalentne veze na netopljivu bazu od celuloze, Sephadexa ili nekog drugog polimera. Metoda omogućava dobivanje visoko pročišćenih antitijela u velikim količinama. Postupak izolacije antitijela pomoću imunosuorbenata uključuje tri stupnja:

1) ekstrakcija antitijela iz imunog seruma;

2) ispiranje imunosorbenta iz nespecifičnih proteina;

3) cijepanje antitijela iz ispranog imunosorbensa (obično s puferskim otopinama s niskim vrijednostima pH). Pored ove metode, poznate su i druge metode pročišćavanja antitijela. Mogu se podijeliti u dvije skupine: specifične i nespecifične. Prvi se temelji na disocijaciji antitijela iz kompleksa netopljivog antigena - antitijela (talog, aglutinat). Izvode ga različite tvari; široko rasprostranjena metoda enzimske probave antigena ili flokulatnog toksina - antitoksin amilaza, tripsin, pepsin. Toplinska elucija se također koristi pri t ° 37–56 °.

Nespecifične metode pročišćavanja antitijela temelje se na izolaciji gama globulina: gel elektroforeza, kromatografija na ionsko-izmjenjivačkim smolama, frakcioniranje gel filtracijom kroz Sephadex. Metoda taloženja s natrijevim sulfatom ili amonijem je široko poznata. Ove metode su primjenjive u slučajevima visokih koncentracija protutijela u serumu, na primjer, s hiperimunizacijom..

Filtracija gela kroz Sephadex, kao i upotreba smola za izmjenu iona, omogućuju odvajanje antitijela prema veličini njihovih molekula.

Uporaba antitijela

Antitijela, posebno gama globulini, koriste se za liječenje i prevenciju difterije, ospica, tetanusa, plinske gangrene, antraksa, leptospiroze, protiv stafilokoka, bjesnoće, gripe i dr. Posebno pripremljeni i pročišćeni dijagnostički serumi koriste se u serološkoj identifikaciji patogena (vidi Mikrobna identifikacija). Utvrđeno je da se pneumokoki, stafilokoki, salmonela, bakteriofagi itd. Adsorbiraju na odgovarajuća antitijela, pridržavaju trombocita, eritrocite i ostale strane čestice. Taj se fenomen naziva imunološka adhezija. Pokazano je da proteinski receptori trombocita i eritrociti, koji su uništeni tripsinom, papainom i formalinom, igraju ulogu u mehanizmu ove pojave. Reakcija imunološke adhezije ovisi o temperaturi. Uzima se u obzir prianjanjem korpuskularnog antigena ili hemaglutinacijom zbog topljivog antigena u prisutnosti antitijela i komplementa. Reakcija je vrlo osjetljiva i može se koristiti kako za određivanje komplementarnih tako i na vrlo malim količinama protutijela (0,005-0,01 μg dušika). Imunološka adhezija pospješuje fagocitozu leukocita.

Suvremene teorije stvaranja antitijela

Postoje poučne teorije o stvaranju antitijela, prema Krimu antigen je izravno ili neizravno uključen u stvaranje specifičnih imunoglobulina, te teorije koje uključuju stvaranje genetski postojećih antitijela na sve moguće antigene ili stanice koje sintetiziraju ta antitijela. To uključuje teorije selekcije i teoriju represije - derepresije koja omogućava sintezu bilo kojeg antitijela po jednoj stanici. Predložene su i teorije koje nastoje shvatiti procese imunološkog odgovora na razini cijelog organizma, uzimajući u obzir interakciju različitih stanica i općeprihvaćene ideje o sintezi proteina u tijelu..

Teorija izravne Gaurowitz-Pauling matrice svodi se na činjenicu da antigen, ulazeći u stanice koje proizvode antitijela, igra ulogu matrice koja utječe na stvaranje molekule imunoglobulina iz peptidnih lanaca, čija sinteza prolazi bez sudjelovanja antigena. "Intervencija" antigena pojavljuje se tek u drugoj fazi formiranja proteinske molekule - fazi uvijanja peptidnih lanaca. Antigen mijenja terminalne N-aminokiseline budućeg antitijela (imunoglobulin ili njegov pojedinačni peptidni lanac) tako da oni postaju komplementarni odrednicama antigena i lako dolaze u kontakt s njim. Tako nastalo antitijelo se odvaja od antigena, ulazi u krvotok, a oslobođeni antigen sudjeluje u stvaranju novih molekula antitijela. Ova je teorija iznijela niz ozbiljnih prigovora. Ne može objasniti formiranje imunološke tolerancije; superiornu količinu antitijela koje proizvodi stanica po jedinici vremena po broju molekula antigena, mnogostruko manjem u njemu; trajanje proizvodnje antitijela u tijelu, izračunato kroz godine ili tijekom života, u usporedbi sa znatno kraćim razdobljem zadržavanja antigena u stanicama itd. Također treba napomenuti da plazma ili limfoidne stanice koje proizvode antitijela ne asimiliraju antigen, iako prisutnost nativnog antigena ili njegove fragmenti u stanicama za sintezu antitijela ne mogu se potpuno isključiti. Nedavno je Gaurowitz (F. Haurowitz, 1965.) predložio novi koncept prema kojem antigen mijenja ne samo sekundarnu, već i primarnu strukturu imunoglobulina..

Teorija indirektne matrice Burnet - Fenner stekla je slavu 1949. godine. Njegovi autori vjerovali su da antigen makromolekule i najvjerojatnije njegove determinante prodiru u jezgre staničnih stanica i uzrokuju nasljedno fiksne promjene u njima, a rezultat toga je stvaranje antitijela na taj antigen. Dopuštena je analogija između opisanog procesa i transdukcije u bakterijama. Nova kvaliteta stvaranja imunoloških globulina koje stanice dobivaju prenosi se na potomstvo stanica u bezbroj generacija. Međutim, pitanje uloge antigena u opisanom procesu bilo je kontroverzno..

Upravo je ta okolnost prouzročila teoriju prirodne selekcije Ernea (K. Jerne, 1955.).

Teorija prirodne selekcije Erne. Prema ovoj teoriji, antigen nije matrica za sintezu antitijela i ne uzrokuje genetske promjene u stanicama koje proizvode antitijela. Njegova se uloga svodi na odabir postojećih "normalnih" antitijela koja se spontano pojavljuju na različitim antigenima. To se događa kao da: antigen, ulazeći u tijelo, nađe odgovarajuće antitijelo, kombinira se s njim; rezultirajući kompleks antigen-antitijelo apsorbiraju stanice koje stvaraju antitijela, a one dobivaju poticaj za stvaranje antitijela ove vrste.

Burnetova teorija klonske selekcije (F. Burnet) bila je daljnji razvoj Erneove ideje o selekciji, ali ne protutijela, već stanica koje proizvode antitijela. Burnet vjeruje da se kao rezultat općeg procesa diferencijacije u embrionalnom i postnatalnom razdoblju nastaju mnogi klonovi limfoidnih ili imunološki kompetentnih stanica iz mezenhimskih stanica koje mogu reagirati s različitim antigenima ili njihovim determinantama i stvarati antitijela - imunoglobuline. Priroda odgovora limfoidnih stanica na antigen u embrionalnom i postnatalnom razdoblju je različita. Embrion uopće ne proizvodi globuline ili ih malo sintetizira. Međutim, pretpostavlja se da oni stanični klonovi koji su sposobni reagirati s antigenom determinanti vlastitih proteina reagiraju s njima i uništavaju se kao rezultat te reakcije. Dakle, stanice koje tvore anti-A-aglutinine kod ljudi s krvnom skupinom A i anti-B-aglutinina kod ljudi s krvnom grupom B. Vjerojatno će umrijeti. Ako unesete bilo koji antigen u zametak, on će uništiti odgovarajući stanični klon na isti način, a novorođenče će tijekom sljedećeg života teoretski biti tolerantno na ovaj antigen. Proces uništavanja svih klona stanica u vlastitim proteinima embrija završava u trenutku njegovog rođenja ili izlaska iz jajeta. Sada novorođenče ima samo „svoje“ i prepoznaje bilo kojeg „vanzemaljca“ koji mu se ugradio u tijelo. Burnet također omogućava očuvanje "zabranjenih" klonova stanica sposobnih reagirati s autoantigenima organa koji su tijekom razvoja bili izolirani iz stanica koje proizvode antitijela. Prepoznavanje "izvanzemaljaca" osiguravaju preostali klonovi mezenhimskih stanica, na površini kojih se nalaze odgovarajući antideterminanti (receptori, stanična antitijela), komplementarni odrednicama "vanzemaljskog" antigena. Priroda receptora je genetski određena, odnosno kodirana je na kromosomima i ne unosi se u stanicu zajedno s antigenom. Prisutnost gotovih receptora neminovno dovodi do reakcije ovog klona stanica s ovim antigenom, čija posljedica su sada dva procesa: stvaranje specifičnih antitijela - imunoglobulina i umnožavanje stanica ovog klona. Burnet priznaje da mezenhimska stanica koja je dobila antigenu stimulaciju, redom mitoze, rađa populaciju kćeričkih stanica. Ako se takva stanica naselila u medulu limfnog čvora, nastaje stvaranje plazma stanica, kad se ta smjesti u limfnim folikulima - do limfocita, u koštanoj srži - do eozinofila. Kćeri kćeri sklone su somatskim ireverzibilnim mutacijama. Kad se izračuna cijeli organizam, broj mutirajućih stanica dnevno može biti 100 000 ili 10 milijuna, i, samim tim, mutacije će osigurati stanične klonove bilo kojem antigenu. Burnetova teorija izazvala je veliko zanimanje istraživača i veliki broj eksperimentalnih eksperimenata. Najvažniji dokaz teorije bili su dokazi o prisutnosti imunoglobulinskih receptora sličnih antitijelima na prekursorima stanica koje proizvode antitijela (limfociti iz koštane srži) i prisutnosti interkistronskog mehanizma isključenja u stanicama koje proizvode antitijela za antitijela različitih specifičnosti.

Teoriju represije i derepresije formulirao je L. Szilard 1960. godine. Prema ovoj teoriji, svaka stanica koja proizvodi antitijelo može potencijalno sintetizirati bilo koje antitijelo na bilo koji antigen, ali taj proces inhibira represor enzima koji su uključeni u sintezu imunoglobulina. Zauzvrat, stvaranje represora može se inhibirati utjecajem antigena. Sylard vjeruje da stvaranje antitijela kontroliraju posebni neprobavljivi geni. Njihov broj doseže 10 000 za svaki pojedinačni (haploidni) skup kromosoma.

Lederberg (J. Lederberg) vjeruje da u genima odgovornim za sintezu globulina postoje mjesta koja kontroliraju stvaranje aktivnih centara protutijela. Normalno, funkcija ovih mjesta je inhibirana i zbog toga dolazi do sinteze normalnih globulina. Pod utjecajem antigena, kao i, eventualno, pod utjecajem određenih hormona, mjesta gena odgovorna za stvaranje aktivnih centara antitijela dezinficiraju se i stimuliraju, a stanica počinje sintetizirati imunološke globuline.

Prema H. ​​N. Zhukov-Verezhnikovu (1972), evolucijski prekursori antitijela bili su zaštitni enzimi slični onima koji se pojavljuju u bakterijama stečene otpornosti na antibiotike. Kao i antitijela, enzimi se sastoje od aktivnog (s obzirom na supstrat) i pasivnog dijela molekule. Zbog svoje ekonomičnosti, mehanizam "jedan enzim - jedan supstrat" ​​zamijenjen je mehanizmom "pojedinih molekula sa varijabilnim dijelom", odnosno antitijela s varijabilnim aktivnim centrima. Podaci o stvaranju antitijela provode se u zoni "rezervnog gena" ili u "zoni redundance" na DNA. Takva suvišnost, očito, može biti lokalizirana u nuklearnoj ili plazmidnoj DNK, koja pohranjuje „evolucijske informacije. koji je igrao ulogu unutarnjeg mehanizma koji "nacrta" kontrolu nasljedne varijabilnosti. " Ova hipoteza sadrži poučnu komponentu, ali nije u potpunosti poučna..

P. F. Zdrodovsky dodjeljuje antigenu ulogu represora određenih gena koji kontroliraju sintezu komplementarnih antitijela. Istovremeno, antigen, kako Zdrodovsky priznaje, u skladu sa Selyjevom teorijom, iritira adenohypophysis, što rezultira proizvodnjom hormona rasta (STH) i adrenokortikotropnih (ACTH) hormona. STH stimulira reakciju limfoidnih organa u plazmi i antitijela, koje zauzvrat potiču antigenom, a ACTH, djelujući na korte nadbubrežne žlijezde, uzrokuje oslobađanje kortizona. Ovo potonje u imunološkom sustavu inhibira plazmacitnu reakciju limfoidnih organa i sintezu antitijela u stanicama. Sve su ove odredbe eksperimentalno potvrđene..

Djelovanje sustava hipofize - nadbubrežne žlijezde na proizvodnju antitijela može se otkriti samo u prethodno imuniziranom tijelu. Upravo taj sustav organizira anamnestičke serološke reakcije kao odgovor na unošenje različitih nespecifičnih podražaja u tijelo.

Dubinska studija staničnih promjena u procesu imunološkog odgovora i nakupljanje velikog broja novih činjenica potkrijepili su stav da se imunološki odgovor provodi samo kao rezultat suradnje interakcija određenih stanica. U skladu s tim, predloženo je nekoliko hipoteza..

1. Teorija suradnje dvije stanice. Nagomilano je mnogo činjenica koje ukazuju da se imunološki odgovor u tijelu provodi u uvjetima interakcije različitih vrsta stanica. Postoje dokazi da su makrofazi prvi koji asimiliraju i modificiraju antigen, ali nakon toga se limfoidne stanice „upućuju“ na sintezu antitijela. Istodobno se pokazalo da suradnja postoji i između limfocita koji pripadaju različitim subpopulacijama: između T-limfocita (o timusu ovisan, anthenreaktivni, koji potječu od žlijezda timusa) i B-stanica (timus neovisnih, prekursora stanica koje stvaraju antitijela, limfocita koštane srži).

2. Teorije suradnje triju stanica. Prema stavovima Roitta (I. Roitt) i drugih (1969), antigen se hvata i obrađuje makrofazima. Takav antigen stimulira antigen-reaktivne limfocite koji prolaze transformaciju u blastoidne stanice, koje osiguravaju odloženu preosjetljivost i pretvaraju se u dugovječne stanice imunološkog pamćenja. Te stanice stupaju u suradnju s progenitornim stanicama koje tvore antitijela, a koje se za razliku razlikuju proliferacijom u stanice koje stvaraju antitijela. Prema Richteru (M. Richter, 1969.), većina antigena ima slab afinitet za stanice koje tvore antitijela, stoga je za proizvodnju antitijela potrebna sljedeća procesna interakcija: antigen + makrofag - obrađen antigen + antigen-reaktivna stanica - aktivirani antigen + prekursor stanice koja stvara antitijelo - antitijelo. U slučaju visokog afiniteta antigena, postupak će izgledati ovako: antigen + prekursor stanica koje stvaraju antitijela - antitijela. Pretpostavlja se da u uvjetima opetovane stimulacije antigenom posljednji izravno dolazi u kontakt s memorijskom stanicom koja formira antitijelo ili imunološkom stanicom. Taj je položaj potvrđen većom radioresistencijom ponovljenog imunološkog odgovora od primarne, što se objašnjava različitom otpornošću stanica koje sudjeluju u imunološkom odgovoru. Postumirajući potrebu za tro-staničnom suradnjom u genetiki antitijela, R. V. Petrov (1969, 1970) vjeruje da će se sinteza antitijela dogoditi samo ako matična stanica (prekursor stanice koja stvara antitijelo) istovremeno primi obrađeni antigen iz makrofaga i induktor imunopoeze iz antigen-reaktivne stanice, nastaje nakon njegove (antigenski reaktivne stanice) stimulacije antigenom. Ako matična stanica dođe u kontakt samo s antigenom koji obrađuje makrofag, stvara se imunološka tolerancija (vidjeti Imunološka tolerancija). Ako postoji kontakt između matične stanice i samo antigen-reaktivne stanice, tada se sintetizira nespecifični imunoglobulin. Pretpostavlja se da ovi mehanizmi stoje u osnovi inaktivacije neispavanih matičnih stanica limfocitima, budući da je induktor imunopoeze, ulazeći u alogensku matičnu ćeliju, antimetabolit za nju (syngeneične ćelije su stanice s identičnim genomom, alogenične stanice su istog tipa, s različitim genetskim sastavom).

Alergijska antitijela

Alergijska antitijela su specifični imunoglobulini nastali djelovanjem alergena kod ljudi i životinja. To se odnosi na antitijela koja cirkuliraju u krvi u slučaju alergijskih reakcija neposrednog tipa. Postoje tri glavne vrste alergijskih antitijela: osjetljivost na kožu ili reakcije; blokira i hemaglutinira. Biološka, ​​kemijska i fizikalno-kemijska svojstva alergijskih antitijela osobe su osebujna (tab.).

Ova svojstva se oštro razlikuju od svojstava taložnih, komplement-vežućih antitijela, aglutinina i drugih opisanih u imunologiji.

Sredstva se obično koriste za označavanje homolognih antitijela za osjetljivost kože. Ovo je najvažnija vrsta alergijskih ljudskih protutijela, čije je glavno svojstvo sposobnost provođenja pasivne reakcije povećane osjetljivosti na koži zdravog primatelja (vidjeti Prausnitz-Kustner reakciju). Reagins imaju niz karakterističnih svojstava koja ih razlikuju od relativno dobro proučenih imunih protutijela. Međutim, mnoga pitanja koja se odnose na svojstva sredstava i njihovu imunološku prirodu ostaju neriješena. Konkretno, neriješeno pitanje je homogenost ili heterogenost sredstava u smislu njihove pripadnosti određenoj klasi imunoglobulina..

Blokiranje protutijela javlja se kod bolesnika s polinozom u procesu specifične hiposenzibilizacijske terapije antigenom kojim se vrši hiposenzibilizacija. Svojstva ove vrste antitijela nalikuju onima precipitacijskih antitijela..

Hemaglutinirajuća antitijela obično se podrazumijevaju kao antitijela iz seruma čovjeka i životinje koja mogu specifično aglutinirati crvene krvne stanice spojene s peludnim alergenom (indirektna ili pasivna reakcija hemaglutinacije). Vezivanje površine crvenih krvnih stanica na peludni alergen postiže se različitim metodama, na primjer, primjenom tanina, formalina, dvostruko diazotiziranog benzidina. Hemaglutinirajuća antitijela mogu se naći kod osoba preosjetljivih na biljni pelud, i prije i nakon specifične terapije hiposenzibilizacijom. Tijekom ove terapije dolazi do transformacije negativnih reakcija u pozitivne ili porasta titra reakcije hemaglutinacije. Hemaglutinirajuća antitijela imaju svojstvo da se apsorbiraju brzo na crvena krvna zrnca tretirana peludnim alergenom, posebice na neke njihove frakcije. Imunosorbenti uklanjaju hemaglutinirajuća antitijela brže nego reagini. Hemaglutinirajuća aktivnost je također donekle povezana s protutibilizirajućom kožom protutijela, međutim, uloga kože osjetljivih protutijela u hemaglutinaciji naizgled je mala, budući da ne postoji povezanost između osjetljivosti na kožu i hemaglutinirajućih protutijela. S druge strane, postoji povezanost između hemaglutinirajućih i blokirajućih antitijela, kako kod osoba alergičnih na biljni pelud, tako i kod zdravih pojedinaca imuniziranih biljnim peludom. Ove dvije vrste antitijela imaju mnogo sličnih svojstava. U procesu specifične terapije hiposenzibilizacijom dolazi do povećanja razine i ovog i drugog tipa antitijela. Hemaglutinirajuća antitijela na penicilin nisu identična antitijela koja senzibiliziraju kožu. Glavni razlog nastanka hemaglutinirajućih antitijela bila je terapija penicilinom. Očigledno, hemaglutinirajuća antitijela trebaju se svrstati u skupinu antitijela koja nekoliko autora nazivaju "svjedocima antitijela".

Godine 1962. Shelley (W. Shelley) predložio je poseban dijagnostički test zasnovan na takozvanoj degranulaciji bazofilnih leukocita krvi zečeva pod utjecajem reakcije alergena na specifična antitijela. Međutim, priroda antitijela koja sudjeluju u ovoj reakciji i njihov odnos s cirkulirajućim reagensima nisu dobro razumljivi, iako postoje dokazi o povezanosti ove vrste antitijela s razinom reakcije u bolesnika s polinozom.

Uspostavljanje optimalnih omjera alergena i ispitnog seruma izuzetno je važno u praktičnom smislu, posebno u studijama s vrstama alergena, podaci o kojima još nisu sadržani u relevantnoj literaturi.

Slijedeće vrste protutijela mogu se pripisati alergijskim antitijelima životinja: 1) antitijela u eksperimentalnoj anafilaksiji; 2) antitijela kod spontanih alergijskih bolesti životinja; 3) antitijela koja igraju ulogu u razvoju Arthusove reakcije (poput taloženja). Tijekom eksperimentalne anafilaksije, u općoj i lokalnoj, u krvi životinja nalaze se posebne vrste anafilaktičkih antitijela s svojstvom pasivno senzibiliziranja kože životinja iste vrste..

Pokazano je da anafilaktička preosjetljivost zamoraca s livadskim peludima iz livadne polena prati cirkulaciju osjetljivih na kožu antitijela u krvi. Ova tijela koja senzibiliziraju kožu imaju mogućnost provesti homolognu pasivnu senzibilizaciju kože in vivo. Zajedno s tim homolognim preosjetljivim kožnim antitijelima, u općoj preosjetljivosti zamorca s alergenima iz livadnog polena pelud protutijela otkrivena pasivnom hemaglutinacijom s bis-diazotiziranim benzidinom cirkuliraju u krvi. Preosjetljiva na kožu protutijela koja ostvaruju homologni pasivni prijenos i imaju pozitivnu povezanost s anafilaksijom klasificiraju se kao homološka anafilaktička antitijela ili homocitotropna antitijela. Koristeći izraz "anafilaktička antitijela", autori im pripisuju vodeću ulogu u reakciji na anafilaksiju. Počele su se pojavljivati ​​studije koje potvrđuju postojanje homocitotropnih antitijela na proteinske antigene i konjugate kod različitih vrsta eksperimentalnih životinja. Nekoliko autora identificira tri vrste protutijela koja su uključena u alergijske reakcije neposrednog tipa. To su antitijela povezana s novom vrstom imunoglobulina (IgE) kod ljudi i slična antitijela kod majmuna, pasa, zečeva, štakora, miševa. Druga vrsta antitijela su antitijela tipa zamorca koja se mogu fiksirati na mastocitima i izolognim tkivima. Razlikuju se u brojnim svojstvima, posebno su termostabilnija. Vjeruje se da protutijela tipa IgG mogu biti i drugi tip anafilaktičkog antitijela kod ljudi. Treći tip su antitijela koja senzibiliziraju heterologna tkiva koja pripadaju, na primjer, zamorcima klase γ2. Kod ljudi samo IgG antitijela imaju sposobnost senzibiliziranja kože zamorca.

Kod bolesti životinja opisane su alergijska antitijela koja nastaju kao rezultat spontanih alergijskih reakcija. Ta antitijela su termolabilna i imaju senzibilizirajuća svojstva kože..

Nepotpuna antitijela koriste se u medicinskom području prilikom određivanja antigena niza izoseroloških sustava (vidi Krvne grupe) za utvrđivanje krvi koja pripada određenoj osobi u slučajevima kaznenih djela (ubojstva, seksualna djela, prometne nesreće, tjelesne povrede itd.), Kao i ispitivanje osporavanog očinstva i majčinstva. Za razliku od punih antitijela, oni ne izazivaju aglutinaciju crvenih krvnih stanica u fiziološkoj otopini. Među njima se razlikuju dvije vrste protutijela. Prvi od njih su aglutinoidi. Ta protutijela mogu uzrokovati da se crvena krvna zrnca sjedine u proteinskom ili makromolekularnom okruženju. Druga vrsta antitijela su kriptaglutinoidi koji reagiraju u indirektnom Coombsovom testu sa antihammaglobulinskim serumom.

Za rad s nepotpunim antitijelima predloženo je niz metoda koje su podijeljene u tri glavne skupine.

1. Metode kolutinacije. Primijećeno je da nepotpuna antitijela mogu izazvati aglutinaciju crvenih krvnih stanica u proteinu ili makromolekularnom mediju. Kao takav medij koristite AB serum (koji ne sadrži antitijela), goveđi albumin, dekstran, biogel - posebno pročišćeni želatin, doveden do neutralnog pH s puferskom otopinom, itd. (Vidi Konglutinacija).

2. Enzimske metode. Nepotpuna antitijela mogu aglutinirati crvene krvne stanice koje su prethodno liječene određenim enzimima. Za takvu obradu koriste se tripsin, ficin, papain, ekstrakti iz hljebnog kvasca, protelin, bromelin itd..

3. Coombsov test antiglobulinskim serumom (vidjeti Coombsovu reakciju).

Nepotpuna antitijela povezana s aglutinoidima mogu pokazati svoje djelovanje u sve tri skupine metoda. Antitijela povezana s kriptaglutinoidima nisu u stanju agglutinirati crvene krvne stanice ne samo u fiziološkoj otopini, već i u makromolekularnom mediju, kao i blokirati ih u drugom. Ova antitijela otkrivena su samo neizravnim Coombsovim testom, uz pomoć kojih se otkrivaju ne samo antitijela koja se odnose na kriptaglutinoide, već i antitijela koja su aglutinoidi.

Monoklonska antitijela

Iz dodatnih materijala, svezak 29

Klasičan način proizvodnje protutijela za dijagnostičke i istraživačke svrhe je imunizacija životinja specifičnim antigenima i naknadno dobivanje imunoloških seruma koji sadrže antitijela potrebne specifičnosti. Ova metoda ima nekoliko nedostataka, prvenstveno zbog činjenice da imuni serumi uključuju heterogene i heterogene populacije antitijela koja se razlikuju u aktivnosti, afinitetu (afinitet prema antigenu) i biološkom učinku. Konvencionalni imunološki serumi sadrže mješavinu antitijela specifičnih kako za određeni antigen tako i za proteinske molekule koje kontaminiraju. Monoklonska antitijela primljena pomoću klonova hibridnih stanica - hibridomi predstavljaju novu vrstu imunoloških reagensa (vidi). Nesumnjiva prednost monoklonskih antitijela je njihova genetski unaprijed određena norma, neograničena obnovljivost, visoka osjetljivost i specifičnost. Prvi hibridomi izolirani su ranih 70-ih godina 20. stoljeća, međutim, pravi razvoj učinkovite tehnologije stvaranja monoklonskih antitijela povezan je s studijama Köhlera i Milypteyna (G. Kohler, S. Milstein), čiji su rezultati objavljeni u 1975-1976. U sljedećem desetljeću daljnji je razvoj novi smjer u staničnoj inženjerstvu povezan s proizvodnjom monoklonskih antitijela..

Hibridomi nastaju fuzijom limfocita hiperimuniziranih životinja sa stanicama koje su presadili plazmaciti različitog porijekla. Hibridomi nasljeđuju od jednog od roditelja sposobnost proizvodnje specifičnih imunoglobulina, a od drugog, sposobnost neograničene reprodukcije. Klonirana populacija hibridnih stanica može dugo producirati genetski homogene imunoglobuline određene specifičnosti - monoklonska antitijela. Najčešće korištena monoklonska antitijela proizvedena hibridomima dobivenim uporabom jedinstvene mišje stanične linije MORS 21 (RE).

Nepobedivi problemi tehnologije monoklonskih antitijela uključuju složenost i složenost dobivanja stabilnih visoko produktivnih hibridnih klonova koji proizvode monospecifične imunoglobuline; poteškoća u dobivanju hibridoma koji proizvode monoklonska antitijela na slabe antigene koji nisu u stanju inducirati stvaranje stimuliranih B-limfocita u dovoljnim količinama; nedostatak određenih svojstava imunoloških seruma u monoklonskim antitijelima, npr. sposobnost stvaranja taloga s kompleksima drugih antitijela i antigena, na čemu se temelje mnogi dijagnostički ispitni sustavi; niska učestalost fuzije limfocita koja proizvodi antitijela s mijelomskim stanicama i ograničena stabilnost hibridoma u masovnim kulturama; niska stabilnost tijekom skladištenja i povećana osjetljivost monoklonskih antitijela na promjene pH, temperature inkubacije, kao i na smrzavanje, odmrzavanje i izloženost kemijskim čimbenicima; poteškoće u dobivanju hibridoma ili transplantabilnih proizvođača humanih monoklonskih antitijela.

Gotovo sve stanice u populaciji kloniranih hibridoma proizvode monoklonska antitijela iste klase i potklase imunoglobulina. Monoklonska antitijela mogu se modificirati korištenjem metoda staničnog imunološkog inženjerstva. Dakle, moguće je dobiti „triome“ i „quadrome“ koji stvaraju monoklonska antitijela dvostruke unaprijed određene specifičnosti, promijeniti proizvodnju pentameričnog citotoksičnog IgM u proizvodnju pentamernih ne-citotoksičnih IgM, monomernih ne-citotoksičnih IgM ili IgM s smanjenim afinitetom, a također i prebacivanje (uz zadržavanje specifičnog antigena) Izlučivanje IgM do sekrecije IgD, a izlučivanje IgGl u IgG2a, IgG2b ili IgA izlučivanje.

Mišji genom osigurava sintezu preko 1 * 10 7 različitih inačica antitijela koje specifično djeluju s epitopima (antigenskih odrednica) proteinskih, ugljikohidratnih ili lipidnih antigena prisutnih u stanicama ili mikroorganizmima. Moguće je stvaranje tisuća različitih antitijela na jedan antigen, koji se razlikuju u specifičnosti i afinitetu; na primjer, imunizacija homogenim ljudskim stanicama inducira do 50 000 različitih antitijela. Upotreba hibrida omogućava vam da odaberete gotovo sve varijante monoklonskih antitijela koje se mogu inducirati na ovaj antigen u tijelu eksperimentalne životinje.

Raznolikost monoklonskih antitijela dobivenih na istom proteinu (antigenu) zahtijeva određivanje njihove fine specifičnosti. Karakterizacija i izbor imunoglobulina sa potrebnim svojstvima među brojnim vrstama monoklonskih antitijela koji su u interakciji s ispitivanim antigenom često se pretvaraju u mnogo naporniji eksperimentalni rad od dobivanja monoklonskih antitijela. Ove studije uključuju razdvajanje skupa antitijela u skupine specifične za pojedine epitope, nakon čega slijedi odabir u svakoj skupini najbolje opcije za afinitet, stabilnost i druge parametre. Za određivanje specifičnosti epitopa najčešće se koristi metoda kompetitivnog imunološkog ispitivanja enzima..

Procjenjuje se da se primarni niz 4 aminokiseline (uobičajena veličina epitopa) može pojaviti do 15 puta u aminokiselinskom slijedu molekule proteina. Međutim, opažaju se unakrsne reakcije s monoklonskim antitijelima mnogo niže nego što se može očekivati ​​iz ovih izračuna. To se događa jer su daleko od svih ovih mjesta izražene na površini molekule proteina i prepoznaju ih antitijela. Pored toga, monoklonska antitijela detektiraju sekvence aminokiselina samo u specifičnoj konformaciji. Treba imati na umu da niz aminokiselina u molekuli proteina nije statistički raspodijeljen, a mjesta vezanja antitijela puno su veća od minimalnog epitopa koji sadrži 4 aminokiseline.

Primjena monoklonskih antitijela otvorila je ranije nepristupačne mogućnosti za proučavanje mehanizama funkcionalne aktivnosti imunoglobulina. Prvi put koristeći monoklonska antitijela, bilo je moguće identificirati antigene razlike u proteinima koji su prethodno bili serološki nerazlučivi. Utvrđene su nove razlike u podvrstama i soju između virusa i bakterija, te su otkriveni novi stanični antigeni. Koristeći monoklonska antitijela, pronađene su antigene veze između struktura, čije postojanje nije moguće pouzdano dokazati upotrebom poliklonskih (konvencionalnih imunoloških) seruma. Upotreba monoklonskih antitijela omogućila je identificiranje konzervativnih antigenih determinanti virusa i bakterija sa širokom skupnom specifičnošću, kao i epitope specifične za sojeve s velikom varijabilnošću i varijabilnošću..

Od temeljne je važnosti otkrivanje antigenih determinanti korištenjem monoklonskih antitijela koji potiču proizvodnju zaštitnih i neutralizirajućih antitijela na infektivne agense, što je važno za razvoj terapijskih i profilaktičkih lijekova. Interakcija monoklonskih antitijela s odgovarajućim epitopima može dovesti do sterickih (prostornih) prepreka za ispoljavanje funkcionalne aktivnosti proteinskih molekula, kao i do alosternih promjena koje transformiraju konformaciju aktivnog dijela molekule i blokiraju biološku aktivnost proteina.

Samo uz pomoć monoklonskih antitijela bilo je moguće proučiti mehanizme kooperativnog djelovanja imunoglobulina, međusobnog potenciranja ili međusobne inhibicije antitijela usmjerenih na različite epitope istog proteina.

Za proizvodnju golemih količina monoklonskih antitijela češće se koriste tumori ascitesa miševa. Čisti pripravci monoklonskih antitijela mogu se dobiti na medijumu bez seruma u fermentiranim kulturama suspenzija ili u sustavima dijalize, u mikrokapsuliranim kulturama i uređajima kao što su kapilarne kulture. Za dobivanje 1 g monoklonskih antitijela potrebno je približno 0,5 1 ascitne tekućine ili 30 1 kultura tekućine inkubirane u fermentorima sa specifičnim stanicama hibridoma. U proizvodnim uvjetima nastaju vrlo velike količine monoklonskih antitijela. Značajni troškovi za proizvodnju monoklonskih antitijela opravdavaju se visokom učinkovitošću pročišćavanja proteina na imobiliziranim monoklonskim antitijelima, a koeficijent pročišćavanja proteina u jednostepenoj afinitetnoj kromatografiji iznosi nekoliko tisuća. Afinitetna kromatografija zasnovana na monoklonskim antitijelima koristi se za pročišćavanje hormona rasta, inzulina, interferona, interleukina proizvedenih sojevima bakterija, kvasca ili eukariotskih stanica modificiranih metodama genetskog inženjeringa.

Korištenje monoklonskih antitijela kao dijela dijagnostičkih sklopova brzo se razvija. Do 1984. godine, za klinička ispitivanja u Sjedinjenim Državama preporučeno je oko 60 dijagnostičkih ispitnih sustava pripremljenih pomoću monoklonskih antitijela. Glavno mjesto među njima zauzimaju sustavi ispitivanja za ranu dijagnozu trudnoće, određivanje razine hormona u krvi, vitamina, lijekova, laboratorijsku i drugu dijagnostiku zaraznih bolesti.

Formulirani su kriteriji za odabir monoklonskih antitijela za njihovu upotrebu kao dijagnostičkih reagensa. Oni uključuju visoki afinitet za antigen, koji osigurava vezanje u niskoj koncentraciji antigena, kao i učinkovitu konkurenciju antitijelima organizma domaćina koji su se već vezali za antigene u ispitnom uzorku; orijentacija prema antigenom mjestu, koja obično nije prepoznata protutilima organizma domaćina i zbog toga ih antitijela ne maskiraju; orijentacija protiv opetovanih antigenih determinanti površinskih struktura dijagnosticiranog antigena; polivalentnost koja pruža veću aktivnost IgM u usporedbi s IgG.

Monoklonska antitijela mogu se koristiti kao dijagnostički lijekovi za određivanje hormona i lijekova, toksičnih spojeva, markera malignih tumora, za razvrstavanje i brojanje leukocita, preciznije i brže određivanje pripadnosti krvnoj skupini, za otkrivanje antigena virusa, bakterija, protozoja, za dijagnozu autoimunih bolesti, otkrivanje autoantitijela, reumatoidni faktori, određivanje klasa imunoglobulina u krvnom serumu.

Monoklonska antitijela omogućuju uspješno razlikovanje površinskih struktura limfocita i s velikom točnošću identificirati glavne subpoyulacije limfocita i razvrstati ih u obitelji ljudskih stanica i limfomske stanice. Novi reagensi monoklonskih antitijela olakšavaju određivanje B-limfocita i T-limfocita, potklasa T-limfocita, pretvarajući ih u jedan od jednostavnih koraka izračunavanja krvne formule. Uz pomoć monoklonskih antitijela može se selektivno ukloniti jedna ili druga subpopulacija limfocita, isključujući odgovarajuću funkciju staničnog imunološkog sustava.

Razvijaju se metode za otkrivanje tumora i njihovih metastaza u cijelom organizmu uvođenjem radioaktivnih izotopa označenih monoklonskim antitijelima specifičnim za tumorske antigene. Sposobnost monoklonskih antitijela obilježenih radioaktivnim izotopovima da pronađu jedinstvene antigenske determinante omogućava utvrđivanje veličine i lokalizacije infarkta miokarda. Ovaj se pristup može koristiti za dijagnosticiranje bilo koje druge lezije, uključujući zarazno podrijetlo (uključujući parazitske i bakterijske procese).

Uobičajeno, dijagnostički pripravci temeljeni na monoklonskim antitijelima sadrže imunoglobuline označene radioaktivnim jodom, peroksidazom ili drugim enzimom koji se koristi u reakcijama enzimske imunološke analize, kao i fluorokrome, kao što je fluoresceinski izotiocijanat, koji se koriste u imunofluorescentnoj metodi. Visoka specifičnost monoklonskih antitijela od posebne je važnosti u stvaranju poboljšanih dijagnostičkih proizvoda, povećanju osjetljivosti i specifičnosti radioimunološkog ispitivanja, imunološkog ispitivanja enzima, imunofluorescentnih metoda serološke analize, tipizacije antigena.

Terapijska upotreba monoklonskih antitijela može biti učinkovita ako je potrebno neutralizirati toksine različitog podrijetla, kao i antigene otrova, postići imunosupresiju tijekom transplantacije organa, inducirati komplement ovisnu citolizu tumorskih stanica, popraviti sastav T-limfocita i imunoregulaciju, neutralizirati bakterije otporne na antibiotici, pasivna imunizacija protiv patogenih virusa.

Glavna prepreka terapijskoj primjeni monoklonskih antitijela je mogućnost razvoja štetnih imunoloških reakcija povezanih s heterolognim podrijetlom monoklonskih imunoglobulina. Da bi se to prevladalo, potrebno je dobiti ljudska monoklonska antitijela. Uspješne studije u ovom smjeru omogućuju upotrebu monoklonskih antitijela kao vektora za ciljano davanje kovalentno vezanih lijekova.

Razvijaju se terapijski pripravci specifični za strogo definirane stanice i tkiva i s ciljanom citotoksičnošću. To se postiže konjugacijom visoko toksičnih proteina, npr. Toksina difterije, s monoklonskim antitijelima koja prepoznaju ciljne stanice. Usmjereni monoklonskim antitijelima, kemoterapeutska sredstva sposobna su selektivno uništiti tumorske stanice u tijelu koje nose specifični antigen. Monoklonska antitijela mogu djelovati i kao vektor kada su ugrađena u površinske strukture liposoma, što osigurava isporuku značajnih količina lijekova sadržanih u liposomima u organe ili ciljne stanice.

Dosljedna upotreba monoklonskih antitijela ne samo da će povećati sadržaj informacija običnih seroloških reakcija, već će pripremiti i pojavu fundamentalno novih pristupa proučavanju interakcije antigena i antitijela.